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產(chǎn)品名稱(chēng):磷酸化蛋白提取試劑盒

產(chǎn)品型號(hào):BC3730

產(chǎn)品報(bào)價(jià):

產(chǎn)品特點(diǎn):磷酸化蛋白提取試劑盒
用于哺乳動(dòng)物組織和細(xì)胞中提取總蛋白,試劑盒中的裂解液含有蛋白酶抑制劑和磷酸酶抑制劑,作用較為強(qiáng)烈,可快速獲得總蛋白,可用于免疫印跡實(shí)驗(yàn)等基礎(chǔ)研究實(shí)驗(yàn)

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BC3730磷酸化蛋白提取試劑盒的詳細(xì)資料:

磷酸化蛋白提取試劑盒

磷酸化蛋白提取試劑盒用于哺乳動(dòng)物組織和細(xì)胞中提取總蛋白,試劑盒中的裂解液含有蛋白酶抑制劑和磷酸酶抑制劑,作用較為強(qiáng)烈,可快速獲得總蛋白,可用于免疫印跡實(shí)驗(yàn)等基礎(chǔ)研究實(shí)驗(yàn),由于含有上述的酶抑制劑,不能用于研究蛋白激酶和磷酸激酶的研究。本品僅用于科研。

產(chǎn)品組成:


 

 規(guī)格儲(chǔ)存條件
裂解液100 ml2-8 oC
磷酸酶抑制劑(100x1ml-20 oC
蛋白酶抑制劑(100x1 ml
PMSF100x1ml



操作方法:
1、組織總蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF;混勻,放置在冰上備用;
稱(chēng)取0.1g的新鮮組織,放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處,用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎,然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液,研磨直沒(méi)有明顯的組織塊,這個(gè)過(guò)程注意冰上操作;
將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中,4 oC 12000g離心30min;
吸取上清新的管中;
進(jìn)行蛋白定量或者變性進(jìn)行蛋白實(shí)驗(yàn)。
(提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復(fù)凍融,避免長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存。)
2、細(xì)胞總蛋白的提取
裂解液的用量:107個(gè)細(xì)胞需要裂解液1ml;
貼壁細(xì)胞:棄去培養(yǎng)基,用冷的PBS洗兩次,棄去PBS,然后加入計(jì)算好的細(xì)胞裂解液;在冰上用細(xì)胞刮刀進(jìn)行刮離細(xì)胞,
將刮離的細(xì)胞裂解液移入EP管中,顛倒裂解20-30min
懸浮細(xì)胞:4 oC 400g離心收集細(xì)胞,用冷的PBS洗兩次細(xì)胞,同樣按細(xì)胞數(shù)加入裂解液,
渦旋10s,放置冰上裂解10min,重復(fù)3-4次;
裂解完畢之后,將細(xì)胞裂解液4 oC 12000g離心30min;
將上清移入新的EP管中;
進(jìn)行蛋白定量或者變性進(jìn)行蛋白實(shí)驗(yàn)。
(提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復(fù)凍融,避免長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存。)

注意事項(xiàng):
實(shí)驗(yàn)過(guò)程,所有試劑都要需要預(yù)冷或者即融,保證操作過(guò)程中的低溫環(huán)境;
PSMF(有毒)現(xiàn)用現(xiàn)加,因?yàn)镻MSF在水溶液中會(huì)快速降解;

相關(guān)文獻(xiàn):

《Proanthocyanidins Protect against β-Hydroxybutyrate-Induced Oxidative Damage in Bovine Endometrial Cells》 作者:Xi Cheng,Shuhua Yang,Chuang Xu, Lanzhi Li,Yi Zhang, Yang Guo, Cai Zhang, Peng Li, Miao Long,Jianbin He 期刊:Molecules. 影響因子:3.098 PMID:30678309
《Luteoloside attenuates neuroinflammation in focal cerebral ischemia in rats via regulation of the PPARγ/Nrf2/NF-κB signaling pathway》 作者:Qiaoling Li,Zixia Tian,Minghui Wang,Jiejian Kou,Chunli Wang,Xuli Rong,Jing Li,Xinmei Xie,Xiaobin Pang 期刊:International Immunopharmacology 影響因子:3.361 PMID:30502652
《β?elemene inhibits oxygen?induced retinal neovascularization via promoting miR?27a and reducing VEGF expression》 作者:Weilai Zhang, Lei Chen ,Jin Geng, Limin Liu, Li Xu 期刊:Molecular Medicine Reports 影響因子:1.851 PMID:30664207

 

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