產(chǎn)品名稱:酸性蛋白酶(ACP)活性檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品型號(hào):BC2280
產(chǎn)品特點(diǎn):酸性蛋白酶(ACP)活性檢測(cè)試劑盒測(cè)定意義:CP是一種在酸性環(huán)境下催化蛋白質(zhì)水解的酶。該酶主要用于酒精發(fā)酵、啤酒釀造、毛皮軟化、果酒澄清、醬油釀造、飼料等。
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酸性蛋白酶(ACP)活性檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格:50管/24樣 產(chǎn)品商標(biāo):solarbio
保存與運(yùn)輸:4℃保存或-20℃保存; 參考價(jià)格:650
庫存狀態(tài):現(xiàn)貨
關(guān)鍵字: 酸性蛋白酶檢測(cè)試劑盒|ACP檢測(cè)試劑盒|酸性蛋白酶|試劑盒
簡要介紹:
CP是一種在酸性環(huán)境下催化蛋白質(zhì)水解的酶。該酶主要用于酒精發(fā)酵、啤酒釀造、毛皮軟化、果酒澄清、醬油釀造、飼料等。
酸性條件下,ACP催化酪蛋白水解產(chǎn)生酪氨酸;在堿性條件下,酪氨酸還原磷鉬酸化合物生成鎢藍(lán);鎢藍(lán)在680nm有特征吸收峰,通過測(cè)定其吸光度增加,來計(jì)算ACP活性。
產(chǎn)品詳細(xì)描述
產(chǎn)品內(nèi)容:
提取液:液體35mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:粉劑×1瓶,4℃保存。臨用前加10 mL蒸餾水溶解。
試劑二:粉劑×1瓶,4℃避光保存。臨用前加入10 mL提取液,沸水浴中磁力攪拌溶解。
試劑三:液體50ml×1瓶,4℃保存。
試劑四:液體10mL×1瓶,4℃保存。
標(biāo)準(zhǔn)品:液體1ml×1支,0.25 μ mol/mL標(biāo)準(zhǔn)酪氨酸溶液,4℃保存。
產(chǎn)品說明:
ACP是一種在酸性環(huán)境下催化蛋白質(zhì)水解的酶。該酶主要用于酒精發(fā)酵、啤酒釀造、毛皮軟化、果酒澄清、醬油釀造、飼料等。
酸性條件下,ACP催化酪蛋白水解產(chǎn)生酪氨酸;在堿性條件下,酪氨酸還原磷鉬酸化合物生成鎢藍(lán);鎢藍(lán)在680nm有特征吸收峰,通過測(cè)定其吸光度增加,來計(jì)算ACP活性。
試驗(yàn)所需自備儀器和樣品:
研缽、臺(tái)式離心機(jī)、可見分光光度計(jì)、水浴鍋、磁力攪拌器、可調(diào)式移液槍、1mL玻璃比色皿、1.5 mL EP管和蒸餾水。
操作步驟:
一、粗酶液提取:
稱約0.1g組織,加入1mL提取液,冰上充分研磨,10000rpm 4℃離心10min,取上清,即粗酶液,置冰上待測(cè)。或直接稱取0.1g酶制品,加入1mL提取液,置冰上待測(cè)。
二、測(cè)定:
1.分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長到680 nm,蒸餾水調(diào)零。
2.試劑一、試劑二和試劑三置于30℃水浴保溫30min以上。
3.樣本測(cè)定(在1.5mLEP管中依次加入下列試劑)
試劑名稱(µL) | 對(duì)照管 | 測(cè)定管 | 空白管 | 標(biāo)準(zhǔn)管 |
粗酶液 | 100 | 100 | ||
試劑一 | 200 | |||
試劑二 | 200 | |||
混勻后30℃水浴保溫10min | ||||
試劑一 | 200 | |||
試劑二 | 200 | |||
混勻后10000rpm 4℃離心10min,取上清 | ||||
上清 | 200 | 200 | ||
蒸餾水 | 200 | |||
標(biāo)準(zhǔn)品 | 200 | |||
試劑三 | 1000 | 1000 | 1000 | 1000 |
試劑四 | 200 | 200 | 200 | 200 |
混勻后30℃水浴保溫20min |
取1mL于1mL玻璃比色皿中,在680nm測(cè)定光吸收,分別記為A對(duì)照管、A測(cè)定管、A空白管、A標(biāo)準(zhǔn)管。
三、酸性蛋白酶活性計(jì)算:
(1)按蛋白濃度計(jì)算
ACP活性單位(U)定義:30℃每毫克蛋白每分鐘催化水解產(chǎn)生1μmol酪氨酸
ACP活性(U/mg prot)
=C標(biāo)準(zhǔn)品×(A測(cè)定管-A對(duì)照管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)×V1÷(Cpr×V2)÷T
=0.125×(A測(cè)定管-A對(duì)照管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷Cpr
(2)按樣本鮮重計(jì)算
AP活性單位(U)定義:30℃每克樣品每分鐘催化水解產(chǎn)生1 μ mol酪氨酸。
AP活性(U/g)
=C標(biāo)準(zhǔn)品×(A測(cè)定管-A對(duì)照管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)×V1÷(W×V2÷V3)÷T
=0.125×(A測(cè)定管-A對(duì)照管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷W
C標(biāo)準(zhǔn)品:0.25 μ mol/mL標(biāo)準(zhǔn)酪氨酸溶液; Cpr:粗酶液蛋白質(zhì)濃度(mg/mL);W:樣品質(zhì)量(g);V1:酶促反應(yīng)總體積(mL),0.5mL;V2:加入反應(yīng)體系中粗酶液體積(mL),0.1 mL;V3:粗酶液總體積(mL),1mL;T:催化反應(yīng)時(shí)間(min),10min。
注意:若反應(yīng)較弱,(A測(cè)定管-A對(duì)照管)差值較小,可適當(dāng)延長反應(yīng)時(shí)間(20-30min),即第1步水浴時(shí)間,后計(jì)算酶活時(shí)對(duì)公式進(jìn)行修改。
相關(guān)文獻(xiàn):
《Hematopoietic Substrate-1-Associated Protein X-1 Regulates the Proliferation and Apoptosis of Endothelial Progenitor Cells Through Akt Pathway Modulation》 作者:XIN-BIN GUO,XIN DENG,YING WEI 期刊:Wiley Online Library 影響因子: PMID:29139175
《MicroRNA?93?5p increases multidrug resistance in human colorectal carcinoma cells by downregulating cyclin dependent kinase inhibitor 1A gene expression》 作者:Shi?Jun Wang, Yun?Fei Cao, Zu?Qing Yang, Zhi?Yuan Jiang, Bin Cai, Jiao Guo, Sen Zhang, Xiao?Long Zhang, Feng Gao 期刊:Oncology Letters 影響因子:0.237 PMID:
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