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產(chǎn)品名稱:PCR試劑 2×Pfu PCR MasterMix (不含染料)

產(chǎn)品型號:PC1350

產(chǎn)品報價:

產(chǎn)品特點(diǎn):PCR試劑 2×Pfu PCR MasterMix (不含染料)
貨號:PC1350
規(guī)格 :500U/1000U
濃度 :5U/ul
保存 :-20℃保存, 有效期少一年。

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PC1350PCR試劑 2×Pfu PCR MasterMix (不含染料)的詳細(xì)資料:

PCR試劑 2×Pfu PCR MasterMix (不含染料)
貨號:PC1350 
規(guī)格 :500U/1000U
濃度 :5U/ul
保存 :-20℃保存, 有效期少一年。


產(chǎn)品簡介 :
     Pfu DNA Ploymerase 是從克隆有 Pyrococcus furiosis DNA Ploymerase 基因的大腸桿菌中表達(dá)并經(jīng)過柱純化分離出來的重組蛋白,其分子量為 90kD。由于 Pfu 酶具有 3’→5’核酸外切酶活性,它能糾正 DNA 擴(kuò)增過程中產(chǎn)生的錯配,而傳統(tǒng)的 Taq 酶卻不能,其它耐熱 DNA Polymerase 如 Vent、Deep Vent、Tli、UITma 等雖具有校正功能, 但 Pfu 酶是目前已發(fā)現(xiàn)的所有耐熱 DNA Polymerase 中出錯率低的。 Pfu 酶無 5’→3’核酸外切酶活性,PCR 反應(yīng)中的延伸速度一般為 0.5-1kb/min,比 Taq 酶要低。Pfu 酶比 Taq 酶熱穩(wěn)定性更好,95 1 ℃ 小時仍保持90%以上的活性,對于 GC 含量很高的模板,變性溫度可以提高到 98℃而不影響其活性。Pfu 酶的 PCR 產(chǎn)物為平末端,可加 A 處理再與 T-載體連接或使用平末端克隆載體。


活性定義 :
    1 單位(U) Pfu DNA Polymerase 活力定義為在 74℃,30 分鐘內(nèi),以活性化的大馬哈魚精子 DNA 作為模板/引物,將 10 nmol 脫氧核苷酸摻入到酸不溶物質(zhì)所需的酶量。


質(zhì)量控制 :
    SDS-PAGE 檢測 Pfu DNA Polymerase 純度大于 99%; 經(jīng)檢測無外源核酸酶活性; PCR 方法檢測無宿主殘余DNA;能有效地擴(kuò)增人類基因組中的單拷貝基因;室溫存放一周,無明顯活性改變。


酶貯存緩沖液 :
    50mM Tris-HCl (pH 8.2); 0.1 mM EDTA; 1 mM DTT; 50% glycerol;其他成份。


適用范圍 :
    用于 DNA 的高保真擴(kuò)增,如基因表達(dá)克隆、基因定點(diǎn)突變、細(xì)胞內(nèi)基因點(diǎn)突變的分析(SNP)和末端補(bǔ)平等。
    建議 PCR 體系(以 50µl 反應(yīng)體系為例)

Template <0.5µg
上游引物(10µM)  1µl
下游引物(10µM)  1µl
10×Buffer(含 Mg 2+ ) 5µl
dNTP(各 2.5mM)  4µl
Pfu DNA Polymerase  0.5-1µl
ddH2O up to 50µl


注意事項(xiàng) :

1、PCR 反應(yīng)體系加樣時,后一步加入 Pfu DNA Ploymerase,整個過程宜在冰上操作。
2、取 Pfu DNA Ploymerase 做 PCR 反應(yīng)時,請用高壓滅菌處理過的吸頭。
3、10×Pfu Buffer 中含 20 mM Mg 2+ ,如 PCR 反應(yīng)需要較高 Mg 2+ 濃度,請另行加入。
4、 用Pfu酶擴(kuò)增時, 引物的純度要求較高, 引物長度大于18個堿基, Tm值在55-80℃之間, 引物濃度在0.1-0.5uM之間,比 Taq 酶略高。


相關(guān)產(chǎn)品 :

PC1320 2×Pfu PCR MasterMix ( 含染料)
PC2200 dNTPs Mix(10mM each)
D1020  10×DNA 上樣緩沖液
T1060  50×TAE  緩沖液
G8142  GoldView II 型核酸染色劑 (5000×)

 

PCR試劑 2×Pfu PCR MasterMix (不含染料)訂購說明:

1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨,一般情況下都能訂貨當(dāng)日發(fā)貨。 
2、部分非常用產(chǎn)品,需提前1-2日預(yù)訂,海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂。 
3、部分產(chǎn)品價格會因貨期、批次等因素發(fā)生變化,若有變動以訂貨當(dāng)日新價格為準(zhǔn)。 
4、每日訂單截止時間為16點(diǎn)整,部分城市可到17點(diǎn)整,因超過截止時間造成當(dāng)日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。
5、請辦理完貨款后,將收據(jù)、底單等連同收貨人的地址、姓名、等以傳真、、短信、等形式通知我們。


PCR試劑 2×Pfu PCR MasterMix (不含染料)運(yùn)輸說明:

1、極低溫產(chǎn)品:極低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過程中加裝干冰運(yùn)輸。用干冰把產(chǎn)品包裹起來,再用泡沫盒密封,膠帶層層粘住泡沫盒,放入索萊寶的箱子,然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。
2、低溫產(chǎn)品:低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過程中加裝索萊寶冰袋運(yùn)輸。事先用冰袋把產(chǎn)品包裹起來,再使用泡沫盒密封,用膠帶嚴(yán)實(shí)密封泡沫盒,再放入索萊寶的箱子(保溫效果少可以持續(xù)一周),然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。
3、常溫產(chǎn)品:常溫產(chǎn)品運(yùn)輸過程中無需加冰或者特殊包裝。產(chǎn)品由公司庫房人員快速配貨,準(zhǔn)確快速高效的快遞保證產(chǎn)品快速送達(dá)您的手中。

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