產(chǎn)品名稱:蛋白定量試劑 BCA蛋白濃度測定試劑盒
產(chǎn)品型號(hào):PC0020
產(chǎn)品特點(diǎn):蛋白定量試劑 BCA蛋白濃度測定試劑盒貨號(hào) :PC0020規(guī)格 :500 微孔(500T)保質(zhì)期 :有效期 1 年。堿性條件下,蛋白將 Cu 2+ 還原為 Cu + , Cu + 與 BCA 試劑形成紫藍(lán)色的絡(luò)合物,測定其在 562nm 處的吸收值,并與標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)比,即可計(jì)算待測蛋白的濃度。
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蛋白定量試劑 BCA蛋白濃度測定試劑盒
貨號(hào) :PC0020
規(guī)格 :500 微孔(500T)
保質(zhì)期 :有效期 1 年。
產(chǎn)品內(nèi)容 :
包裝(500微孔) | 保存 | |
BCA 試劑 | 100ml | 室溫 |
Cu 試劑 | 3ml | 室溫 |
PBS 稀釋液 | 30ml | 室溫 |
BSA 蛋白標(biāo)準(zhǔn) (5mg/ml BSA) | 1ml | -20℃ |
產(chǎn)品簡介 :
堿性條件下,蛋白將Cu 2+ 還原為 Cu + , Cu + 與 BCA 試劑形成紫藍(lán)色的絡(luò)合物,測定其在 562nm 處的吸收值,并與標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)比,即可計(jì)算待測蛋白的濃度。常用濃度的去垢劑 SDS,Triton X-100,Tween 不影響檢測結(jié)果,但受螯合劑(EDTA,EGTA)、還原劑(DTT,巰基乙醇)和脂類的影響。實(shí)驗(yàn)中,若發(fā)現(xiàn)樣品稀釋液或裂解液本身背景值較高,可試用 Bradford 蛋白濃度測定試劑盒。
操作說明 :
一. 微孔酶標(biāo)儀法
1. 配制工作液:根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品數(shù)量,按 50 體積 BCA 試劑加 1 體積 Cu 試劑(50:1)配制成 BCA工作液,充分混勻(混合時(shí)可能會(huì)有渾濁,但混勻后就會(huì)消失)。BCA 工作液室溫 24 小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定。
2. 稀釋標(biāo)準(zhǔn)品:取 10 微升 BSA 標(biāo)準(zhǔn)品用 PBS 稀釋 100 微升(樣品一般可用 PBS 稀釋) ,使終濃度為 0.5mg/ml。將標(biāo)準(zhǔn)品按 0, 2, 4, 6, 8, 12, 16, 20 微升加到 96 孔板的蛋白標(biāo)準(zhǔn)品孔中,加 PBS 補(bǔ)足 20 微升。
3. 將樣品作適當(dāng)稀釋(好多做幾個(gè)梯度,如作 2 倍、4 倍、8 倍稀釋) ,加 20 微升到 96 孔板的樣品孔中。由于移液器在取小量樣品時(shí)誤差偏大,標(biāo)準(zhǔn)線前面的點(diǎn)可能不很準(zhǔn)確,所以盡可能的讓樣品點(diǎn)落在標(biāo)準(zhǔn)線 1/2 后。
4. 各孔加入 200 微升 BCA 工作液,37℃放置 15-30 分鐘。用酶標(biāo)儀測定 A562nm,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出蛋白濃度。使用溫箱孵育時(shí),應(yīng)注意防止因水分蒸發(fā)影響檢測結(jié)果。
二. 分光光度計(jì)法
如沒有酶標(biāo)儀,可用分光光度計(jì)在離心管中混勻后加入比色皿中比色。
步驟如下:
1. 配制工作液: 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品數(shù)量,按 50 體積 BCA 試劑加 1 體積 Cu 試劑(50:1)配制成 BCA工作液,充分混勻(混合時(shí)可能會(huì)有渾濁,但混勻后就會(huì)消失)。BCA 工作液室溫 24 小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定。
2. 稀釋標(biāo)準(zhǔn)品:取 100 微升 BSA 標(biāo)準(zhǔn)品用 PBS 稀釋 1ml(樣品一般可用 PBS 稀釋) ,使終濃度為0.5mg/ml。
3. 取八支(或者更多)5ml 離心管,標(biāo)上號(hào),按下表加入試劑。
4. 37℃放置 15-30 分鐘。用分光光度計(jì)測 562nm 處吸光值,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出蛋白濃度。
注意事項(xiàng) :
1. 長期不用時(shí),Cu 試劑與 PBS 稀釋液可置于 2-8℃保存,如發(fā)現(xiàn)細(xì)菌污染則應(yīng)丟棄。BCA 試劑在低溫條件下出現(xiàn)結(jié)晶沉淀時(shí),可 37℃溫育使其*溶解, 不影響使用。
2. 樣品中若含有較多干擾物質(zhì)時(shí),請(qǐng)采用 Bradford 蛋白濃度測定試劑盒。
3. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
相關(guān)產(chǎn)品 :
PC0001 BSA 標(biāo)準(zhǔn)品( 5mg/ml )
PC0021 BCA 試劑
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D1060 10× 電泳轉(zhuǎn)移緩沖液
PE0010 ECL Plus 熒光檢測試劑 (ECL 超敏發(fā)光液 )
蛋白定量試劑 BCA蛋白濃度測定試劑盒
參考文獻(xiàn):
《Effect of 1α, 25-dihydroxyvitamin D3 on the osteogenic differentiation of human periodontal ligament stem cells and the underlying regulatory mechanism》 作者:Yawen Ji,Panpan Zhang,Yixiao Xing,Linglu Jia,Yunpeng Zhang,Tingting Jia,Xuan Wu,Bin Zhao,Xin Xu 期刊:International Journal of Molecular Medicine 影響因子:2.928 PMID:30365053
《Dexmedetomidine attenuates the neurotoxicity of propofol toward primary hippocampal neurons in vitro via Erk1/2/CREB/BDNF signaling pathways》 作者:Youbing Tu, Yubing Liang, Yong Xiao, Jing Lv, Ruicong Guan, Fei Xiao, Yubo Xie, and Qiang Xiao 期刊:Drug Design, Development and Therapy 影響因子:3.486 PMID:30858699
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