產品名稱:Skim Milk脫脂奶粉
產品型號:D8340
產品特點:Skim Milk脫脂奶粉索萊寶是脫脂奶粉生產廠家或代理銷售公司。所售脫脂奶粉價格合理,質量穩定,歡迎訂購。
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品牌:Solarbio | 貨號:D8340
Skim Milk脫脂奶粉可用于制備微生物培養基;配制ELISA、western等實驗的封閉液。western blot經過轉印以后,膜上有了蛋白,但是還有很多地方是沒有蛋白覆蓋的,通過脫脂奶粉的蛋白孵育后,這些空白的膜都被脫脂奶粉的蛋白覆蓋了,就防止后續孵育的一抗和二抗與印跡膜的非特異結合。在科研實驗中,脫脂奶粉也是常用的生化試劑之一。
關于和BSA作為封閉劑的一些問題
問:western blot中脫脂奶粉封閉的是哪些蛋白?原理是什么?
答:脫脂奶粉中主要是乳清蛋白和酪蛋白。原理就是用非抗原?的蛋白去封閉膜,避免標記抗體固定在膜上引起背景增高。
問:請問封閉液和抗體稀釋液用BSA?和脫脂奶粉有什么區別呢?
答:所謂封閉是用以減少或消除載體上的非特異性結合蛋白的分子,一般是脫脂奶粉或BSA。對WesterBlot來說兩者均為常用封閉劑。脫脂奶粉的成份遠較BSA復雜,如果要做ELISA或者phage display時候,我們還是用BSA。我推測也沒有依據說脫脂奶粉就不能用,注意的是各種品牌的脫脂奶粉中殘留的脂質量不同, 脂質是會影響實驗結果的,即使是用于WesterBlot也要有所挑選。
問:封閉的時候,為什么一定要用脫脂奶粉?
答:膜上有蛋白缺損點,不用蛋白封蛋白缺損點容易出現非特異染色。也可用BSA封,效果并不比脫脂奶粉好。
問:western封閉為什么用脫脂牛奶,不用全脂的?
答:是因為如果含有脂肪的話,乳脂會與奶粉中的蛋白結合,導致封閉的時候蛋白濃度下降,影響封閉的效果,有可能造成封閉不*,所以都會用脫脂的奶粉來做。
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相關文獻:
《Effect of 1α, 25-dihydroxyvitamin D3 on the osteogenic differentiation of human periodontal ligament stem cells and the underlying regulatory mechanism》 作者:Yawen Ji, Panpan Zhang ,Yixiao Xing ,Linglu Jia ,Yunpeng Zhang, Tingting Jia ,Xuan Wu ,Bin Zhao, Xin Xu 期刊:International Journal of Molecular Medicine 影響因子:2.928 PMID:30365053
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