色譜分析法出現至今已有不少年頭,但仍然在分離分析領域占有十分重要的位置。不過色譜分析法(GC/HPLC)在應用上仍有一些局限性,例如應用于分析一些無紫外吸收、受壓易分解變性的物質時,就需要一些輔助試劑或特殊色譜柱來解決難題了。衍生化方法是氣相、液相色譜分析中十分常用的處理方法,它將不能分析的樣品通過衍生化試劑反應轉化為可分析的化合物。衍生化試劑也由此成為了色譜分析試驗中經常被用到的試劑類型。今天就來詳細的了解一下衍生化試劑吧!
什么是衍生化試劑?
衍生化是一種利用化學變換把化合物轉化成類似化學結構物質的技術,常用的反應有酯化、?;?、烷基化、硅烷化、環化和離子化等。在色譜法應用衍生化技術,可以將不易被檢測的樣品與特定的衍生化試劑混合,生成穩定的便于量化和分離的衍生化物。
什么情況下需要使用衍生化試劑?
理想情況下,衍生化反應是一個反應迅速、定量進行、副產物極少或易于除去的化學反應。選擇衍生化試劑的目的包括:
◆ 提高檢測性能
◆ 改變分析物的分子結構或極性以獲得出色的色譜分離效果
◆ 增加樣品揮發性
◆ 穩定分析樣品
如何選擇合適的衍生化試劑?
對于衍生化試劑的選擇,首先要考慮的是目標樣品中是否存在可發生化學反應的一個或者多個合適的活性官能團,同時,還需要確定適合這類衍生化合物的檢測機制。目前常見的兩種衍生化類型是在目標樣品中引入發色團或熒光官能團,然后分別采用紫外或熒光檢測的方法進行測定。在選擇衍生化試劑時一般需要考慮以下幾點:
◆ 使用性質穩定的衍生化試劑
◆ 選擇的衍生化試劑以及衍生過程中產生的副產物應為不可檢測的、或者是易于與目標樣品分離的
◆ 目標樣品與衍生化試劑的反應條件易于實現
◆ 盡可能采用無毒的試劑
◆ 衍生化過程盡可能實現自動化
使用衍生化試劑的時候還需注意什么?
◆ 為了避免衍生化試劑失活,取用和保存的過程需要格外注意
◆ 要盡量在比較干燥的地方取用試劑,盡量縮短打開瓶蓋的時間
◆ 衍生化反應要注意過量反應,反應不*會導致檢測不充分
◆ 衍生化反應完成后應盡快進行色譜分析
什么情況下需要使用衍生化試劑?
理想情況下,衍生化反應是一個反應迅速、定量進行、副產物極少或易于除去的化學反應。選擇衍生化試劑的目的包括:
◆ 提高檢測性能
◆ 改變分析物的分子結構或極性以獲得出色的色譜分離效果
◆ 增加樣品揮發性
◆ 穩定分析樣品
Solarbio的衍生化試劑
索萊寶公司整合資源,配以高效嚴謹的質檢水平,重磅推出分析實驗周邊試劑第一彈——Solarbio衍生化試劑系列產品。
Solarbio衍生化試劑的優勢:
◆ 純度高:所有產品均具有較高純度,無衍化副產品
◆ 適用范圍廣:針對電化學檢測標記、紫外檢測標記、熒光檢測標記等應用均有對應的產品提供
◆ 產品種類豐富:滿足色譜分析中絕大多數衍生化反應的需求
Solarbio衍生化試劑應用案例
案例一:
SV8010 L-纈氨酸的衍生化檢測方法
衍生化試劑:12mg OPA(SDP7010)、0.1mL乙醇、0.9mL 0.1mol/L pH10.4硼酸鈉緩沖液、10μL 3-MPA
進樣程序:吸取L-纈氨酸(SV8010)標液1μL、OPA衍化試劑2μL、0.1mol/L pH10.4硼酸鈉緩沖液2μL,混合5次,等待1min,進樣。
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