透析袋的處理
分子在半透膜間的分離是由膜兩側溶液的濃度差驅動的,受相對于膜內微孔尺寸的分子大小
(分子質量)的限制。 微孔尺寸決定著截留分子質量,截留分子質量的定義是當90%的溶質分子可
被膜截留時的分子質量。 實際某一溶質的通透性不僅取決于分子的大小,還取決于分子的形狀、
分子的水化程度及其所帶的電荷。 這些參數(shù)均受溶劑的性質、pH以及離子強度的影響。 因此截留
分子質量只能作為參考,而不能地用來預測在各種溶質和溶劑下的透析行為。 透析膜孔徑范
圍很大(從100Da到2000kDa). 在透析大多數(shù)質粒DNA和許多蛋白質時,截留分子質量在12000
'"'-14000Da之間比較適合。
(1)將透析管剪成適當?shù)拈L度(10"'20cm) 的小段,即形成透析袋。
(2)在大體積的2% (m/ V)碳酸氫納和lmmol/L EDTA(pH8. 0)中將透析袋煮沸10min。
(3)將透析袋用蒸館水*漂洗。
(4)將透析袋置lmmol/L EDTA(pH8. 0)中煮沸10min.
(5)待透析袋冷卻,存放于4
0
C,應確保透析袋始終浸沒在液體中。
重要:從此步起用透析袋時一定要戴手套操作。
(6)在使用之前要用茶館水將透析袋里外加以清洗。
【;主】
也可將透析袋放在廣口瓶中充滿水, 松動瓶蓋, 于20psiCl.40kg/cm2)高壓滅菌10mi n,代替第4步
用lmmol/L EDTA(pH8. 0)中煮沸10mi日的操作。